PRÁCTICA 2 : TINCIONES POLICROMAS
OBJETIVO:
Tiene por objetivo aumentar en contraste entre esas estructuras
y el medio que las rodea, y permite por tanto que las células sean visualizadas
microscópicamente con mayor facilidad, utilizando una combinación de colores,
para de esta forma obtener una tinción policroma (varios colores).
FUNDAMENTO:
Las tinciones hematológicas son un conjunto de procesos que
conducen a la coloración de las estructuras que componen las células
sanguíneas. Es una tinción de tipo no vital, en ella las células están muertas
y su coloración requiere un proceso de fijación previo que normalmente se
realiza con etanol o metanol.
TINCIÓN DE MAY-GRUNDWAL-GIEMSA:
MATERIALES:
Agua destilada
Cristalizador
Paralela
Pipeta Pasteur
Tubo de ensayo
Gradilla
Lanceta
REACTIVOS:
Solución de May-Grundwal
Colorante Giemsa
MUESTRA:
Frotis sanguíneo.
TÉCNICA:
1. Primero, con ayuda de una lanceta pinchamos en la yema de los dedos , colocando una gota de sangre sobre un porta hacemos una extensión sanguínea.
Una vez que la tenemos, la dejamos secar al aire.
2.Colocamos el frotis sanguíneo secado al aire sobre la
paralela y la cubrimos (usando la pipeta Pasteur) con la solución de
May-Grunwal, dejándola actuar durante 3 minutos.
3. Pasados los 3 minutos, sin quitar el colorante vamos a
diluir, añadiendo sobre él la misma cantidad de agua destilada que la que
habíamos añadido de colorante. Debemos procurar que este no se vierta. Dejamos
actuar durante 5 minutos.
4. Preparamos una dilución en un tubo de ensayo que
contenga, 5 ml de agua destilada y 5 gotas de colorante Giemsa. Tapamos con
parafina y homogeneizamos bien.
5. Inclinamos el porta para que se vierta y escurra el
colorante. Y seguidamente, sin lavar, cubrimos el porta con la solución de
Giemsa diluida. Dejamos actuar durante 15 minutos.
6. Finalmente, lavamos con abundante agua destilada y dejamos
que se seque totalmente al aire.
7. Una vez lista, podemos observar al microscopio.
Utilizamos también el objetivo de 100x.
TINCIÓN PANÓPTICO RÁPIDO:
MATERIALES:
Agua destilada
Pinzas
Lanceta
REACTIVOS:
-Tres cubetas de Wertheim:
Solución 1: Metanol (fijador)
Solución 2: Santeño (ácido)
Solución 3: Tiacina (básico)
MUESTRA:
Frotis sanguíneo.
TÉCNICA:
1. Pinchamos la yema del dedo y colocando la gota de sangre
en el porta, hacemos la extensión sanguínea. Dejamos que se seque la muestra.
2. Se colocan las tres soluciones en las cubetas de
Wertheim, una cubeta para cada solución.
4. Una vez que lo sacamos de la solución 3 y lo escurrimos,
se lava con agua destilada y se deja secar.
5. Cuando esté seco totalmente procedemos a su observación
al microscopio.
IMÁGENES DE LA TECNICA
Por ultimo miramos los resultados
TINCIÓN DE WRIGHT:
MATERIALES:
Lanceta
Agua destilada
Cristalizador
Paralela
Pipeta Pasteur
REACTIVOS:
Solución de Wright
MUESTRA:
Frotis sanguíneo.
TÉCNICA:
1. Pinchamos la yema del dedo y colocando la gota de sangre en el porta, hacemos la extensión sanguíneas. Dejamos que se seque la muestra.
1. Pinchamos la yema del dedo y colocando la gota de sangre en el porta, hacemos la extensión sanguíneas. Dejamos que se seque la muestra.
2. En esta tinción tampoco es necesario fijar la muestra con
alcohol de metileno, ya que el propio colorante va en solución alcohólica.
Ponemos el porta sobre la paralela y lo cubrimos con la solución de Wright.
Dejamos que actúe uno o dos minutos.
3. Una vez que ha actuado la solución de Wright, le añadimos
la misma cantidad de agua destilada sin quitar el colorante, debemos procurar
que no se vierta. Dejamos actuar durante 4 o 5 minutos.
4. Lavar la extensión con agua destilada hasta que la
muestra tome un color rosado. NO se debe volcar el portaobjetos para eliminar
el colorante antes de lavarlo bien con agua para evitar que se deposite sobre
la preparación quedando restos de él.
5. Dejar que se seque totalmente al aire.
6. Una vez seca, proceder a la observación al microscopio,
usando el objetivo de 100x.
IMÁGENES DE LA TECNICA
RESULTADOS:
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